文章插图
PCR的具体过程如下:
1、模板DNA的变性:模板DNA经加热至93℃左右一定时间后 , 使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离 , 使之成为单链 , 以便它与引物结合 , 为下轮反应作准备 。
2、模板DNA与引物的退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后 , 温度降至55℃左右 , 引物与模板DNA单链的互补序列配对结合 。
3、引物的延伸:DNA模板-引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下 , 以dNTP为反应原料 , 靶序列为模板 , 按碱基配对与半保留复制原理 , 合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链 。
【PCR的具体过程】重复循环变性-退火-延伸三过程 , 就可获得更多的“半保留复制链” , 而且这种新链又可成为下次循环的模板 。每完成一个循环需2~4分钟 , 2~3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍 。
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